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易基因单细胞甲基化测序&单细胞转录组测序
高通量单细胞DNA甲基化测序简介
单细胞DNA甲基化组学研究很大程度上受制于建库技术,传统的文库构建方法或类似于基因组DNA的单细胞扩增技术很难应用到甲基化实验过程中。目前单细胞甲基化研究主要受限于检测成本、不同细胞位点检测共有性差异等。
高通量单细胞甲基化scRBS技术指标:
- 起始量:单细胞;
- 高通量:上百成千个单细胞快速高通量甲基化检测;
- 数据量:单细胞1G测序数据;
- 覆盖度:每个单细胞覆盖4-10M的CG位点;
- 重复性:不同单细胞CG位点覆盖重复性可到达50%以上;
- 分辨率高:单碱基分辨率;
- 性价比高:单个细胞检测费用低至千余元。
多个单细胞检测CG位点的重复性高度一致
单细胞转录组测序(smart-seq2)简介
Smart-seq2技术在单细胞水平对带Poly(A)的RNA进行全长转录组扩增及高通量测序,能够满足高灵敏度、低偏好性的cDNA扩增,得到全长转录本,实现高水平的序列模板转换。
Smart-seq2技术有较好的覆盖范围,可检测到稀有转录本,无需额外的专业设备,应用范围较广,可以解决传统 RNA 定量技术在早期胚胎发育、干细胞、癌症、免疫等研究领域中存在的样品量极低或细胞异质性的问题,是在单细胞水平研究基因表达强有力的工具,极大地拓展了RNA-seq 的应用范围。
技术优势:
- 起始量低:1-1000个细胞或10pg-10ng total RNA即可高效扩增;
- 转录本覆盖度高:通过双端引物扩增全长cDNA,获得全转录组信息,避免3’端和5’端偏好性,产物完整性好;
- 检测灵敏度高:大幅度增加了低表达基因的检出量;
- 碱基分辨率高:可达单碱基分辨率,且可以定位到具体基因的具体转录本;
- 实验可控:质控点多,可从实验的开端判断细胞状况。
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